Методическое пособие к проведению практических работ по общему курсу биохимии для студентов ОЗО биолого-почвенного факультета

Министерство образования Российской Федерации Ростовский государственный университет

В.В. Внуков, А.О. Кучеренко

МЕТОДИЧЕСКОЕ ПОСОБИЕ к проведению практических работ по общему курсу биохимии для студентов ОЗО биолого-почвенного факультета, обучающихся по специальности “Экология”

Ростов-на-Дону 2000

2

Печатается по решению редакционно-издательской комиссии биологопочвенного факультета Ростовского государственного университета Протокол № 6 от 20

Авторы:

ноября 2000 года.

В.В. Внуков - доктор биологических наук,

профессор кафедры биохимии и микробиологии РГУ; А.О. Кучеренко - кандидат биологических наук, ассистент кафедры биохимии и микробиологии РГУ. Рецензент: И.А. Сорокина - кандидат биологических наук, доцент кафедры биохимии и микробиологии РГУ.

3

СОДЕРЖАНИЕ Техника безопасности при работе в биохимической лаборатории ...........................................................................................................

4

Занятие № 1. Качественные реакции на белки и аминокислоты .............

6

Занятие № 2. Ферменты и их свойства ........................................................

9

Занятие № 3. Нуклеиновые кислоты ...........................................................

12

Занятие № 4. Количественное определение содержания глюкозы ..........

14

Семинар. Структура, физико-химические свойства и биологическая роль биоорганических соединений ............................................................ 18 Рекомендуемая литература ...........................................................................

19

4

ТЕХНИКА БЕЗОПАСНОСТИ ПРИ РАБОТЕ В БИОХИМИЧЕСКОЙ ЛАБОРАТОРИИ Общие сведения. Запрещается вход в лабораторию в верхних вещах. Работа в биохимической лаборатории допускается только в специальном халате, так как вероятна возможность загрязнения, порчи одежды при попадании на нее едких реактивов. Обращение со стеклом. Химическая посуда - в большинстве случаев тонкостенная и хрупкая - поэтому при небрежном обращении с ней ее можно разбить и порезаться. Посуду следует держать в руках осторожно, не сжимая сильно пальцами. Химическую посуду нельзя резко ставить на стол. В случае пореза стеклом нужно вначале осмотреть ранку и извлечь из нее осколки стекла, если они есть, а затем обмыть пораненное место, смазать йодом и заклеить лейкопластырем или завязать бинтом. Обращение с реактивами. Все концентрированные кислоты и щелочи должны находиться в вытяжном шкафу. Наливать или насыпать реактивы следует только над столом. Не следует оставлять открытыми банки с реактивами. Пролитые или рассыпанные реактивы нужно немедленно удалить со стола, вытерев стол тряпкой и обмыв водой. Пролитые концентрированные кислоты следует засыпать песком, а затем собрать песок дощечкой. Облитое место необходимо обмыть раствором соды и вытереть тряпкой. При работе с органическими растворителями (спирты, эфиры, ацетон, бензин, дихлорэтан и др.) нельзя определять вещества по запаху, так как может произойти отравление их парами. Наполнение пипеток растворами органических растворителей, кислот, щелочей проводят только при помощи груши, так как при набирании этих веществ ртом они могут попасть в ротовую полость и вызвать ожоги или даже отравление. В случае попадания на кожу концентрированных кислот облитое место нужно вначале обмыть большим количеством воды, а затем разбавленным раствором соды. При попадании растворов щелочей на

5

кожу пораженное место нужно вначале обмыть разбавленным раствором кислоты, а затем водой. Обращение с нагревательными приборами. На практических занятиях по биохимии часто приходится пользоваться спиртовками. Зажигать спиртовку нужно только спичкой. Нельзя нагревать вещества в толстостенной посуде. В пробирке можно нагревать только небольшие количества вещества, жидкость должна занимать не более 1/3 объема пробирки. Отверстие пробирки при нагревании в ней жидкости следует направлять в сторону от себя и рядом находящихся людей. Нельзя наклоняться над спиртовкой. Вначале пробирку с веществом следует слегка прогреть всю, а затем нагревать в нужном месте, не вынимая из пламени спиртовки. Нельзя нагревать пробирку долго в одной точке, так как теплопроводность стекла низкая, жидкость быстро закипит и выплеснется из пробирки. Нагревать пробирку нужно ниже уровня жидкости в ней. После нагревания следует сразу погасить спиртовку, накрыв пламя фарфоровым колпачком. Работа с водяной баней осуществляется только под тягой. Перегоревшие электроплитки нужно сразу же выключить, вынув вилку из штепсельной розетки. При неосторожной работе могут быть ожоги нагретой стеклянной посудой. При ожогах на обожженное место нужно положить ватку, смоченную раствором марганцевокислого калия.

6

Занятие № 1. КАЧЕСТВЕННЫЕ РЕАКЦИИ НА БЕЛКИ И АМИНОКИСЛОТЫ Техника безопасности. На занятии предусматривается работа с концентрированной азотной кислотой и работа со спиртовками. Задачи занятия: 1. Доказать наличие пептидной связи в растворах разных белков. 2. Провести качественные реакции на аминокислоты. 3. Определить наличие некоторых аминокислот в составе белков. 1. КАЧЕСТВЕННАЯ РЕАКЦИЯ НА БЕЛКИ Принцип метода. Биуретовая реакция - качественная реакция на пептидную связь. Реакция основана на образовании внутрикомплексного соединения ионов меди с двумя пептидными связями, выступающими в роли полидентатных лигандов. В щелочной среде раствор белка при добавлении разбавленного раствора сульфата меди окрашивается в розово-фиолетовый цвет: H2N−CH−CO−NH−CH−CO−NH−CH−CO−NH−CH−C=O + 2NaOH + Cu(OН)2 ⎜ ⎜ ⎜ ⎜ \ R2 R3 R4 OH R1

⎯→

R2 O ⎮ ⎢⎢ ...−NH−CH−C=N−CH−C−N−CH−C−... ⎢ ⎢ ⎢ ⎢⎢ R1 O R3 O Cu R4 O R6 O ⎢ ⎢⎢ ⎢ ⎢⎢ ... −NH−CH−C−N−CH−C=N−CH−C−... ⎢ ⎢ R5 O

2− ⎯

∗ 2Na+

Реакция называется биуретовой, так как она характерна и для биурета, состоящего из 2 молекул мочевины (NH2-CO-NH-CO-NH2). Ход работы. В 3 пробирки наливают по I мл растворов: овальбумина (куриного белка), зеина и желатина, добавляют 1 мл 10 % р-ра NаОН и 2 кап-

7

ли 1 % р-ра СиS04. При перемешивании при наличии пептидной связи в исследуемых растворах появляется фиолетовое окрашивание. 2. КАЧЕСТВЕННЫЕ РЕАКЦИИ НА АМИНОКИСЛОТЫ 2.1. КСАНТОПРОТЕИНОВАЯ РЕАКЦИЯ НА АРОМАТИЧЕСКИЕ АМИНОКИСЛОТЫ Принцип реакции. При нагревании с концентрированной азотной кислотой растворы белка дают желтое окрашивание при наличии в белках циклических аминокислот (фенилаланина, тирозина, триптофана) вследствие образования нитропроизводных этих аминокислот: OH

OH NO2

O 2N + 2HNO3 ⎯→ CH2 ⎢ NН2-СН-СООН

+ 2Н2О CH2

⎢ NН2-СН-COOH

тирозин динитротирозин Ход работы. В 4 пробирки наливают по I мл: в 1-ю - р-ра тирозина, во 2-ю - овальбумина (р-ра яичного белка), в 3-ю - зеина, в 4-ю - желатина. Затем во все пробирки добавляют по 3-5 капель концентрированной азотной кислоты до появления мути от свернувшегося белка. Нагревают до появления ярко-желтого окрашивания, осадок при этом постепенно растворяется (происходит гидролиз белка). Результаты опыта вносят в таблицу, приведенную на стр. 9, отмечая в соответствующей графе “+” или “-”. Образование желтых пятен на коже при попадании азотной кислоты обусловлено этой реакцией. 2.2. РЕАКЦИЯ ФОЛЯ НА ЦИСТЕИН Принцип реакции. Растворы цистеина и белков, имеющих в своем составе цистеин, дают с нитропруссидом натрия пурпурное окрашивание. Ход работы. В 4 пробирки наливают по I мл: в 1-ю раствора цистеина,

8

в остальные 3 пробирки - растворов овальбумина, зеина и желатина, добавляют 1 мл насыщенного р-ра (NH4)2SO4 и 2-3 капли 5 % р-ра нитропруссида натрия. Затем раствор подщелачивают несколькими каплями 30 % раствора NаОН. Раствор приобретает пурпурный цвет. Результаты опыта вносят в таблицу. 2.3. РЕАКЦИЯ САКАГУЧИ НА АРГИНИН Принцип реакции. Реакция обусловлена присутствием в молекуле аминокислоты аргинина гуанидиновой группировки. В щелочном р-ре в присутствии гипохлорита натрия гуанидиновая группа аргинина окисляется. Окисленный продукт, соединяясь с α-нафтолом, образует продукт конденсации розово-красного цвета:

ОН

2H2N− C−NH−(CH2)3− CH− COOH +3NaClO +2 ⎢⎢ ⎢ NH NH2 аргинин

2 O=

⎯→ α-нафтол

=N−C−NH−(CH2)3−CH−COOH + 3NaCl + 3H2O ⎢⎢ ⎢ NH NH2

нафтохинонимин Ход работы. В одну пробирку наливают I мл раствора аргинина, в остальные 3 пробирки - по I мл раствора овальбумина, зеина и желатина, добавляют 1-2 капли 10 % р-ра NaOH, затем 1-2 капли спиртового раствора αнафтола. Перемешивают, приливают 1-2 капли гипохлорита натрия и вновь перемешивают. Развивается розово-красное окрашивание. Результаты опьта вносят в таблицу: Определение аминокислотного состава белков. Р-ры белков Аминокислоты 1. Ароматические

овальбумин

зеин

желатин

9 аминокислоты 2. Цистеин 3. Аргинин

Занятие № 2. ФЕРМЕНТЫ И ИХ СВОЙСТВА Техника безопасности. На занятиях предусматривается пользование спиртовками. Быть внимательными при нагревании пробирок с реактивами. Задачи занятия: 1. Провести гидролиз крахмала амилазой, зафиксировав ряд промежуточных стадий. 2. Показать влияние тепловой денатурации на активность фермента. 3. Доказать, что ферменты обладают субстратной специфичностью. 4. Показать действие активатора и ингибитора на активность фермента (амилазы). 1. ДЕЙСТВИЕ АМИЛАЗЫ НА КРАХМАЛ Принцип метода. При действии фермента амилазы на субстрат крахмал происходит разрыв ковалентных гликозидных связей в молекуле гомополимера. Гидролиз крахмала проходит через стадии образования промежуточных продуктов: амилодекстринов (фиолетовая окраска), ахродекстринов (красно-бурая), эритродекстринов (желто-бурая окраска), мальтодекстринов, изомальтозы. Конечными продуктами гидролиза являются мальтоза (дисахарид) или глюкоза (моносахарид). Крахмал с йодом дает черно-синее окрашивание. Отсутствие окраски указывает на образование конечных продуктов гидролиза. Ход работы. В 6 пробирок наливают по 2 мл раствора крахмала, прибавляют 2-3 капли слюны (быстро) во все пробирки и хорошо перемешивают. В 1-ю пробирку сразу вносят каплю йода, в остальные пробирки йод добавляют с интервалом 3-4 минуты (время зависит от активности амилазы слюны). В пробирке, где йод не изменяет цвет, гидролиз считается законченным.

10

С этой пробиркой проводят качественную реакцию на глюкозу пробу Троммера, основанную на восстанавливающей способности глюкозы. Пробирку подогревают (йод улетучивается), прибавляют 4-5 капель 10 % рра NaOH и 5-7 капель 7 % р-ра CuSO4. Содержимое нагревают до кипения. В присутствии глюкозы выпадает желтый осадок CuOН, который затем переходит в красный осадок Cu2O. 2. ТЕРМОЛАБИЛЬНОСТЬ ФЕРМЕНТОВ Свойства большинства ферментов ингибироваться при кипячении является характерной особенностью, отличающей ферменты от других катализаторов, и называется термолабильностью. Ход работы. В 2 пробирки наливают по 5 капель слюны и по 1 мл дистиллированной воды. В 1-й пробирке раствор кипятят в течение 2-х минут, во 2-й - оставляют без кипячения.

Затем в обе пробирки добавляют по 2 мл

крахмала, перемешивают. Через 10 минут содержимое каждой пробирки делят на 2 части и проводят качественную реакцию на крахмал с йодом и пробу Троммера на глюкозу. Результаты работы записывают в виде таблицы, отмечая в соответствующей графе “+” или “−”: Содержимое пробирки 1. Амилаза (t=100°C)+крахмал 2. Амилаза (t=25°C)+крахмал

Проба Троммера

Реакция с йодом

3. СПЕЦИФИЧНОСТЬ ФЕРМЕНТОВ Каждый фермент действует на определенный субстрат. Амилаза расщепляет полисахарид крахмал и не действует на дисахариды: мальтозу и сахарозу. Фермент сахараза расщепляет только сахарозу и не расщепляет крахмал. Ход работы. В 2 пробирки наливают по 1 мл р-ра крахмала, а в 2 дру-

11

гие - по 1 мл р-ра сахарозы. Затем добавляют: в 1-ю и 3-ю - 0,5 мл слюны, во 2-ю и 4-ю - 5 капель вытяжки из дрожжей (фермент сахараза). Все пробирки оставляют на 15 мин при t=37 0C. Затем каждую пробирку разделяют на 2 части. В 1-й проводят качественную реакцию на глюкозу - пробу Троммера, а во 2-й - качественную реакцию на крахмал с йодом. Результаты работы записывают в виде таблицы, отмечая в соответствующей графе “+” или “−”: Содержимое пробирки 1. Крахмал+амилаза 2. Крахмал+сахараза 3. Сахароза+амилаза 4. Сахароза+сахараза

Проба Троммера

Реакция с йодом

4. ВЛИЯНИЕ АКТИВАТОРОВ И ИНГИБИТОРОВ НА АКТИВНОСТЬ АМИЛАЗЫ Активаторами и ингибиторами называются вещества, способные ускорять или тормозить активность ферментов. Ход работы. В 3 пробирки наливают по 4 мл крахмала. В 1-ю пробирку вносят по 2 капли 1 % р-ра NaCl, во 2-ю - 2 капли 1 % р-ра CuSO4, а 3-ю оставляют контрольной. В каждую пробирку вносят по 5 капель слюны. Через 10 минут добавляют по 1 капле р-ра йода. Различная окраска проб обусловлена степенью гидролиза крахмала. Делают вывод о влиянии NaCl и CuSO4 на активность амилазы. Занятие № 3. НУКЛЕИНОВЫЕ КИСЛОТЫ Техника безопасности. На занятии предусматривается работа с концентрированными кислотами и работа с водяной баней. Задачи занятия: 1. Научиться выделять ДНП (дезоксинуклеопротеид) из селезенки.

12

2. Провести гидролиз ДНП и качественный анализ продуктов гидролиза. 1. ВЫДЕЛЕНИЕ ДНП ИЗ СЕЛЕЗЕНКИ Ход работы. 1 г селезенки крупного рогатого скота растирают с небольшим количеством песка и 1 мл 1М NaCl в ступке на холоду до гомогенного состояния (2-3 мин.). Затем, с интервалом в 5 минут, последовательно добавляют 4 и 5 мл раствора NaCl, продолжая растирать гомогенат для максимальной экстракции ДНП. Полученный вязкий раствор переносят в мерную центрифужную пробирку и центрифугируют 10 минут при 3000 об/мин. Измеряют объем надосадочной жидкости и переносят ее в стаканчик. Затем, при плавном помешивании стеклянной палочкой, тонкой струей приливают 6-ти кратный объем дистиллированной воды. Выделившиеся из раствора тонкие нити ДНП наматывают на деревянную палочку и переносят в равном количестве в 2 пробирки, одну из которых используют для доказательства белковой природы ДНП, а вторую подвергают гидролизу. 2. ОПРЕДЕЛЕНИЕ БЕЛКОВОЙ ПРИРОДЫ ДНП Дезоксирибонуклеопротеид (ДНП) представляет собой сложный белок, поэтому его наличие можно доказать биуретовой реакцией (см. стр. 6). Ход работы: В первую пробирку с нитями ДНП добавляют 1 мл 10% раствора NaOH, перемешивают. После растворения добавляют 0,5 мл 1% раствора CuS04. Жидкость окрашивается в фиолетовый цвет. 3. КИСЛОТНЫЙ ГИДРОЛИЗ ДНП Во вторую пробирку, содержащую выделенный ДНП, добавляют 5 мл 10% раствора H2SO4, осторожно диспергируют осадок стеклянной палочкой. Пробирку закрывают пробкой с обратным холодильником и ставят на кипя-

13

щую водяную баню на 1 час. Гидролизат после охлаждения отфильтровывают и используют для проведения качественных реакций. 4. РЕАКЦИИ С ГИДРОЛИЗАТОМ С гидролизатом проводят качественные реакции на компоненты ДНК: дезоксирибозу и фосфорную кислоту. Обнаружение пентозы (реакция Дише). Принцип реакции: Дезоксипентозы при нагревании с концентрированными кислотами образуют продукты, которые конденсируются с ароматическим дифениламином (ДФА) с образованием соединений, имеющих синюю окраску. Ход работы. К 1 мл гидролизата приливают 2 мл реактива Дише (раствор ДФА в концентрированных уксусной и серной кислотах). Смесь нагревают в кипящей водяной бане 10 минут. Появляется синее окрашивание раствора. Молибденовая проба на фосфорную кислоту. Принцип реакции: Фосфорная кислота образует с молибденовым реактивом (раствор молибдата аммония в азотной кислоте) желтый кристаллический осадок фосфорномолибденовокислого аммония: H3PO4 + 12(NH4)2MoO4 + 21HNO3 ⎯→ (NH4)3PO4.12MoO3↓ + 21NH4NO3 + 12H2О

Ход работы: К 1 мл гидролизата прибавляют 1 мл молибденового реактива и кипятят 10 минут на водяной бане. В присутствии фосфорной кислоты появляется желтое окрашивание. При охлаждении выпадает желтый кристаллический осадок комплексного соединения. Занятие № 4. КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ ГЛЮКОЗЫ Техника безопасности. На занятии предусматривается работа с во-

14

дяной баней. Задачи занятия: 1. Изучить феррицианидный микрометод определения глюкозы по Хагедорну-Йенсену. 2. Определить содержание глюкозы в цельной крови. Глюкоза распределена равномерно между плазмой и эритроцитами, поэтому можно определять ее содержание в цельной крови, плазме или сыворотке. Методы определения глюкозы разделяют на ферментативные (глюкозооксидазный), редуктометрические (феррицианидный) и колориметрические (ортотолуидиновый). Нормальный уровень глюкозы в крови крыс и человека соответствует 3,3-5,5 ммоль/л. Повышение концентрации глюкозы в крови называется гипергликемия, снижение - гипогликемия. Принцип метода. Глюкоза окисляется красной кровяной солью в щелочной среде до глюконовой кислоты, при этом красная кровяная соль восстанавливается до желтой: СОН COOH | | (СНОН)4 + 2К3Fe(CN)6 + 2KOH —→ (CHOH)4 + 2K4Fe(CN)6 + H2O | | CH2OH СН2ОН

Реакция доходит до конца лишь в присутствии Zn2+. Образуется нерастворимый цинк - железистосинеродистый калий: 2К4Fe(CN)6 + 3ZnSO4 = K2Zn3[Fe(CN)6]2 + 3K2SO4

Избыток красной кровяной соли, не израсходованный на окисление глюкозы, определяется йодометрическим путем: 2К3Fe(CN)6 + 2KJ = 2K4Fe(CN)6 + J2↑

Выделившийся йод оттитровывают тиосульфатом натрия (гипосульфитом): J2 + 2Na2S2O3 = 2NaJ + Na2S4O6. Ход работы. 1. В 2 пробирки наливают по 5 мл 0,45% ZnSO4 и по 1 мл 0,1 н NaOH. Образующийся Zn(OH)2 используют для осаждения белков кро-

15

ви. 2. 1 пробирку оставляют для холостого опыта (определения восстанавливающей способности реактивов). Во 2-ю вносят 0,1 мл крови. 3. Все пробирки помещают в кипящую водяную баню на 3 минуты. Белки свертываются в виде коричнево-черных сгустков и раствор становится прозрачным. 4. Содержимое пробирок отфильтровывают через воронки, заполненные прокипяченной ватой, в пробирки. Дважды промывают дистиллированной водой по 2 мл, промывные воды собирают. 5. К полученному фильтрату добавляют 2 мл 0,005 н красной кровяной соли (отмеряют точно!). 6. Пробы вновь помещают в кипящую водяную баню на 15 мин для протекания реакции восстановления. 7. Определяют остаток непрореагировавшей красной кровяной соли. Для этого добавляют 2 мл 3% СН3СООН и 3 мл тройного раствора, состоящего из NaCl и ZnSO4 (для связывания K4Fe(CN)6) и KI (для реакции с K3Fe(CN)6. Раствор желтеет, выделяется свободный йод, который оттитровывают 0,005 н Na2S2O3 из микробюретки (в качестве индикатора используют крахмал). Расчет. Для расчета содержания глюкозы пользуются специальной таблицей (см. стр. 17), составленной для 0,005 н р-ра гипосульфита. Например, на титрование пробы израсходовано 1,29 мл гипосульфита, на титрование холостого опыта - 1,92 мл. По таблице: 1,29 мл соответствует 0,125 мг глюкозы, а 1,92 мл - 0,014 мг. Содержание глюкозы в 0,1 мл крови = 0,1250,014=0,111 мг, а в 1 мл - 1,11 мг (или 1,11 г/л). Так как молекулярная масса глюкозы 180 моль, то концентрация глюкозы - 6,2 ммоль/л.

16

Таблица. Содержание глюкозы в 0,1 мл крови, в мг.

Гипосульфит, мл

0,00

0,01

0,02

0,03

0,04

0,05

0,06

0,07

0,08

0,09

0,0

0,385

0,382

0,379

0,376

0,373

0,370

0,367

0,364

0,361

0,358

0,1

0,355

0,352

0,350

0,348

0,345

0,343

0,341

0,338

0,336

0,333

0,2

0,331

0,329

0,327

0,325

0,323

0,321

0,318

0,316

0,314

0,312

0,3

0,310

0,308

0,306

0,304

0,302

0,300

0,298

0,296

0,294

0,292

0,4

0,290

0,288

0,286

0,284

0,282

0,280

0,278

0,276

0,274

0,272

0,5

0,270

0,268

0,266

0,264

0,262

0,260

0,259

0,257

0,255

0,253

0,6

0,251

0,249

0,247

0,245

0,243

0,241

0,240

0,238

0,236

0,234

0,7

0,232

0,230

0,228

0,226

0,224

0,222

0,221

0,219

0,217

0,215

0,8

0,213

0,211

0,209

0,208

0,206

0,204

0,202

0,200

0,199

0,197

0,9

0,195

0,193

0,191

0,190

0,188

0,186

0,184

0,182

0,181

0,179

1,0

0,177

0,175

0,173

0,172

0,170

0,168

0,164

0,164

0,163

0,161

1,1

0,159

0,157

0,155

0,154

0,152

0,150

0,148

0,146

0,145

0,143

1,2

0,141

0,139

0,138

0,136

0,134

0,132

0,131

0,129

0,127

0,125

1,3

0,124

0,122

0,120

0,119

0,117

0,115

0,113

0,111

0,110

0,108

1,4

0,106

0,104

0,102

0,101

0,099

0,097

0,095

0,093

0,092

0,090

1,5

0,088

0,086

0,084

0,083

0,081

0,079

0,077

0,075

0,074

0,072

1,6

0,070

0,068

0,066

0,065

0,063

0,061

0,059

0,057

0,056

0,054

1,7

0,052

0,050

0,048

0,047

0,043

0,042

0,041

0,039

0,038

0,036

1,8

0,034

0,032

0,031

0,029

0,027

0,025

0,024

0,022

0,020

0,019

0,017

0,015

0,014

0,012

0,010

0,008

0,007

0,005

0,003

0,002

1,9

17

Семинар. СТРУКТУРА, ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА И БИОЛОГИЧЕСКАЯ РОЛЬ БИООРГАНИЧЕСКИХ СОЕДИНЕНИЙ Вопросы для подготовки семинара. 1. Химическое строение, классификация и физико-химические свойства αаминокислот. 2. Структура белков. Простые и сложные белки. Глобулярные, фибриллярные белки. Биологические функции белков. 3. Ферменты. Классификация. Особенности их структуры. Виды коферментов. 4. Классификация липидов. Связь химического строения и функций различных липидов. 5. Характеристика углеводов и их роль в живом организме. 6. Структурная организация ДНК. Виды РНК и особенности их структуры. Биологические функции нуклеиновых кислот.

18

РЕКОМЕНДУЕМАЯ ЛИТЕРАТУРА для подготовки практических занятий 1. Пустовалова Л.М. Практикум по биохимии. - Ростов-на-Дону: Изд-во “Феникс”, 1999. - 544 с. 2. Алейникова Т.Д., Рубцова Г.В. Руководство к практическим занятиям по биологической химии. - М.: Высшая школа, 1988. - 239 с. 3. Практикум по общей биохимии / Под общ. ред. Ю.Б. Филипповича. - М.: “Просвещение”, 1982. - 311 с. 4. Практикум по биохимии: Учеб. пособие / Под ред. С.Е. Северина, Г.А. Соловьевой. - М.: Изд-во МГУ, 1989. - 509 с.